PowerScript RT SuperMix
货号/规格:R1081/100 rxns, R1082/500 rxns, R1083/2500 rxns
产品说明
PowerScript RT SuperMix是一种优化的5X逆转录混合物,包含两步法RT- qPCR工作流程中第一链cDNA合成所需的所有成分。它含有耐热性逆转录酶,支撑在高温下的cDNA合成。同时含有鼠源RNase抑制剂保护模板RNA不被降解。混合物中包含的随机六聚体和Oligo dT引物,可以充分进行各类RNA的逆转录。本品可对低至单拷贝的RNA进行逆转录,产生的cDNA产物是qPCR检测的理想模板,保证检测的灵敏和准确。
产品组分
组分 | R1081(100 rxns) | R1082(500 rxns) | R1083(2500 rxns) |
PowerScript RT SuperMix | 400 μL | 400 μL×5 | 10 mL |
保存条件
-20℃保存,有效期2年。
适用范围
第一链cDNA 合成
注意事项
l 成功的cDNA合成来自高质量的RNA。高质量的RNA至少应保证全长的完整性并且不含逆转录酶的抑制剂,如EDTA或 SDS。
l 检测所需的RNA量取决于感兴趣转录物的丰度。一般情况下,建议总RNA为1 ng ~ 1 μg或mRNA 0.1 ng ~ 100 μg。
l 在操作过程中,注意防止引入RNase导致RNA降解。RNA最好保存于-70℃,避免反复冻融。
l 基因组DNA或过量产品的存在会干扰目标RNA的准确定量,特别是对于低拷贝目标。无RT对照反应可以通过将PowerScript RT SuperMix在95℃下热失活1分钟再添加模板RNA来模拟无逆转录反应;此外,应设置NTC(无模板对照)反应,以证明逆转录反应是有意义的。
l cDNA产物应置于-20℃或以下保存,避免反复冻融。